高效液相色譜系統(tǒng)采用一種區(qū)別于經(jīng)典液相色譜,基于儀器方法的高效能分離手段,具有高壓、高效、高速、高靈敏度、高選擇性等特點(diǎn)。
高效液相色譜系統(tǒng)采用的相色譜法與反相色譜法不同點(diǎn):
正相色譜法反相色譜法固定相極性高~中中~低流動(dòng)相極性低~中中~高組分洗脫次序極性小先洗出極性大先洗出
從上表可看出,當(dāng)極性為中等時(shí)正相色譜法與反相色譜法沒(méi)有明顯的界線(如氨基鍵合固定相)。
按分離過(guò)程的機(jī)理分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和體積排除色譜。
吸附色譜(Absorption Chromatography):根據(jù)樣品組分對(duì)活性固定相表面吸附親和力的不同實(shí)現(xiàn)分離。
分配色譜(Partition Chromatography):分離基于樣品組分在固定相和流動(dòng)相中的溶解度(分配系數(shù))不同。
離子交換色譜(Ion Exchange Chromatography):根據(jù)樣品組份離子交換親和力的差異分離,簡(jiǎn)稱離子色譜(IC)。
體積排除色譜(Size Exclusion Chromatography):分為GPC和GFC。
GPC(Gel Permeation Chromatography凝膠滲透色譜又稱尺寸排阻色譜):固定相是疏水性凝膠,流動(dòng)相是水或緩沖溶液-有機(jī)溶劑。
GFC(Gel Filtration Chromatography凝膠過(guò)濾色譜又稱水系凝膠色譜):固定相是親水性凝膠,流動(dòng)相是水或緩沖溶液。